Sintesis Nukleotida Bertanda [-32p]ATP Secara Enzimatis Dengan Dl-Gliseraldehid-3-Fosfat

Abstract

Dalam perkembangan biologi molekul, radionuklida dalam bentuk senyawa bertanda telah digunakan sebagai perunut deoxyribonucleic acid (DNA)/ribonucleic acid (RNA) untuk mendalami berbagai macam proses fisiologi dan patologi. Pada penelitian ini akan dibuat senyawa nukleotida bertanda yang dapat digunakan sebagai perunut dalam biologi molekul. Salah satu senyawa tersebut adalah nukleotida bertanda fosfor-32 (32P) [γ-32P]-adenosine triphosphate {[γ-32P]-ATP}. Pembuatan senyawa nukleotida bertanda [γ-32P]-ATP ini melalui reaksi enzimatis dengan prekursor DL-glyceraldehyde 3-phosphate, adenosine di-phosphate (ADP) dan H332PO4, menggunakan enzim gliseraldehid 3-phosphat dehidrogenase, 3-phosphogliserat-kinase dan laktat dehidrogenase. Pemurnian [γ-32P]-ATP hasil sintesis dilakukan berdasarkan metoda pemisahan dari Schendel dan Wells, dengan menggunakan kolom kromatografi DEAE-Sephadex. Dari proses sintesis dan pemurnian yang telah dilakukan berhasil diperoleh [γ-32P]-ATP dengan aktifitas 1,977 mCi dan kemurnian radiokimia 99,65%. Dengan berhasilnya dilakukan sintesis dan pemurnian [γ-32P]-ATP, maka Pusat Teknologi Radiosiotop dan Radiofarmaka akan dapat menyediakan nukleotida bertanda tersebut untuk menunjang penelitian biologi molekul di Indonesia.